草莓传媒18勿入三秒进入在线看_芒果1234回家路高清版_已满i8点此i3进去7y7y

Lentiviral clones
x

在线客服

技术电话

020-32068595
4006020200

微信扫码

OmicsLink? miRNA 3′ UTR target lentiviral clones
货号 产品 规格 形式 说明书

产品信息

相关产品

OmicsLink? miRNA 3′ UTR target lentiviral clones

miRNA 3′ UTR 克隆

复能基因提供哺乳动物表达载体的人、小鼠、大鼠miRNA 3′ UTR克隆,可用于miRNA靶标验证、预测靶标的功能确证和miRNA对靶标的调控作用的研究。本公司提供两套3’UTR报告载体。在pEZX-MT05载体中,我们将3’UTR序列(来源于公开的基因序列数据库)插入到Gaussia荧光素酶报告基因下游,在哺乳动物细胞中由SV40启动子驱动转录生成Gaussia荧光素酶(Gluc)和3’UTR靶标序列的嵌合mRNA,因此无需裂解细胞实时监测Gluc的表达,研究mRNA-miRNA的相互作用。在相同载体(pEZX-MT05)上带有分泌型碱性磷酸酶(SEAP)报告基因。CMV启动子驱动转录的SEAP作为同质粒内的对照,这种双报告系统可以对多样本常规转染进行精确比较。pEZX-MT06是Firefly/Renilla双荧光素酶报告载体。3’UTR序列在Firefly(hLuc)荧光素酶报告基因下游,CMV启动子驱动转录的Renilla(hRLuc)作为同质粒内的对照。通过裂解细胞检测hLuc和hRLuc的表达。


mirna target with luciferase reporter

图1. miRNA 3′ UTR克隆载体骨架


图2. 靶标序列(3′ UTR)表达克隆中miRNA的抑制作用 

已知LIN28基因是miR-125a的靶标。HEK 293细胞转染Lin28 miRNA靶标序列表达克隆(左)或者共转染miR-125a前体miRNA表达克隆(右)。转染24小时后检测GLuc 和内参SEAP活性。仅转染Lin28 miRNA靶标序列表达克隆的细胞中Gluc和SEAP活性之比定为1(左),以此确定共转样本中的比值。如图所示,miR-125a抑制了GLuc-LIN28-3′-UTR克隆中Gluc 70%以上的活性。 


如需订购,请点击跳转商城


女性| 沾化县| 唐山市| 龙泉市| 仁化县| 涡阳县| 冀州市| 镇雄县| 炉霍县| 阿巴嘎旗|